纽约(基因组网新闻)-通过一系列步骤，一个凝血相关F5基因突变根据来自德克萨斯大学健康科学中心和瑞典隆德大学的研究人员的研究，会导致出血性疾病。
正如调查人员在临床研究杂志今天，这种突变导致F5基因被交替拼接，导致蛋白质被截断。这种短蛋白质反过来又与另一种参与凝血的蛋白质结合，使其留在血液中，导致一种出血疾病，这种疾病一直困扰着德克萨斯州东部一个家庭的几代人。
2001年，对这个家庭的一项研究指出，尽管他们有出血障碍的症状，如瘀伤和出血等，但家庭成员的凝血因子测试结果正常，尽管他们的凝血酶原时间延长或部分凝血活蛋白激活时间延长。
一项连锁分析指出，抗凝血酶基因附近的一个位点在患有和没有这种疾病的人之间存在差异，尽管一开始没有发现变异。研究人员随后缩小了F5基因的一个区域，然后进一步缩小到外显子13的一个变体。凝血因子V，简称FV，由F5基因编码，通过与凝血酶和活性因子X相互作用，既能促进也能抑制凝血。
但这一发现被认为不是致病的，因为突变所在的区域不是FV活动所必需的，而且因为受影响的家庭成员有正常的FV凝血结果。研究人员当时推测，这是一种私人的家族变异。
然而，在这项新研究中，UTHSC的Lisa Vincent和她的同事们注意到，携带F5变体的受影响家庭成员的FV蛋白和FV转录本都较短，这表明该变体可能并不是那么良性的。
文森特和她的同事们写道:“我们已经确定了我们认为是第一例常染色体显性出血疾病，原因是编码凝血性FV的基因发生了功能获得性突变。”
此外，他们指出，由于缩短的FV亚型结合并保持TFPIα(一种凝血调节剂)在循环中，目前对TFPI抑制剂的研究可能为受影响的家庭成员提供一种可能的治疗方法。
通过免疫印迹试验，Vincent和她的同事们确定，受影响的家庭成员具有比通常更短的因子V蛋白，而未受影响的家庭成员具有正常长度的蛋白质，他们通过质谱分析证实了这一发现。
此外，RT-PCR分析表明，未受影响的家庭成员具有预期的2946个碱基对的转录本，而受影响的家庭成员具有较小的840个碱基对的转录本。研究人员指出，一些未受影响的家庭成员的较小转录本水平确实较低。
通过对较小的转录本测序，研究人员发现了大约2100个碱基对的帧内缺失，这表明FV-short是由于剪接变体造成的。
研究人员补充说，A2440G变体似乎导致了交替拼接的转录本上调。研究人员指出，与对照组相比，通过RT-qPCR测定，携带A2440G变体的个体fv短转录本表达水平平均增加了22倍。
Vincent和她的同事指出:“我们的结果支持这样的结论，即在对照组中，外显子13的剪接事件正常发生的程度较低，而这种剪接事件的效率因A2440G突变的存在而提高。”
在蛋白质方面，剪接变异和截断的转录本导致因子V蛋白中702个氨基酸的缺失。然而，研究人员指出，这种蛋白质仍然可以被凝血酶激活。
研究人员说，相反，FV-short间接地抑制凝血，它与受影响的家庭成员中的TFPIα有关。事实上，TFPIα似乎优先结合fv短而不是fv长。这种复合物随后在血液中徘徊。
研究人员补充说:“可能是受影响家庭成员血浆中TFPIα与FV-short结合导致其在循环中滞留，从而导致更高的TFPIα血浆浓度。”
血浆中较高的TFPIα水平——研究人员报告称，这些病例的tpi α水平可能比对照组高10倍——可能会导致凝血抑制。
TFPIα的鉴定是导致出血障碍的一系列事件的一部分，这可能为德克萨斯州东部的这个家庭带来一些希望。圣路易斯华盛顿大学医学院的George Broze和Thomas Girard在一份研究报告中补充说:“对潜在病理生理学的阐明表明，目前正在开发的TFPI抑制剂可能提供一种治疗手段。附带的评论在江森自控．